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DAPI染色液(5μg/ml)使用說明書

點擊下載日期:2014/4/29 9:30:16

DAPI染色液簡介:
DAPI細胞染色液(DAPIStainingSolution)是適用于常見細胞和組織細胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihydrochloride,也稱DAPIdihydrochloride,分子式為C16H15N5·2HCl,分子量為350.25?梢源┩讣毎さ乃{色熒光染料,和雙鏈DNA結合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的熒光,靈敏度高于EB。
DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的*大激發(fā)波長為340nm,*大發(fā)射波長為488nm,DAPI和雙鏈DNA結合后,*大激發(fā)波長為364nm,*大發(fā)射波長為454nm。本DAPI染色液可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,亦可以按照具體實驗要求,稀釋到相應濃度后進行染色。一般推薦工作濃度為0.5ug~10ug/ml。

DAPI染色液組成:
DAPIStainingSolution(5μg/ml) 10ml/50ml -20℃避光

主要成分:主要由DAPI、溶劑、防腐劑等組成。
自備材料:
熒光顯微鏡
蒸餾水
微量移液
PBS或生理鹽水

DAPI染色液操作步驟(僅供參考):
對于細胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行DAPI染色,如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的DAPI染色。對于貼壁細胞或組織切片,加入少量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品3倍體積以上的DAPI染色液,混勻。
室溫放置5~8min。
3.輕輕吸取DAPI細胞染色液。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。5.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。
染色結果:細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。

注意事項:
DAPI染色液的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要。
熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測。
為減緩熒光淬滅,可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、避免反復凍融,否則容易失效。
5、DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期:6個月有效。
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